====== 脱ロウ ======

<WRAP tdl right 40%>{{:preparation:dewaxing-3.jpg?400x300|}}
脱ロウ処理
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蝋物質を取り除く処理。脱脂も同時に行う。
蝋物質が残っていると奇麗な標本にはならない。

文献に載っている方法では[[xylene]]と[[phenol]]の混合液等が使われるのだけど、
[[phenol]]は[[deleterious_substance]]でありできるだけ使わないようにするため別の方法を模索している。
加温すれば特に[[phenol]]を使わなくても問題無いように思う。
ただし揮発性が高いので､漏れの少ない[[soaking tube]]を使う。
蝋物質が少ない場合は加温する必要は無い。

===== 道具 =====

  * [[soaking tube]]
  * [[dewaxing agent]]
  * 無水[[;ethanol]](99.5%)。[[:ipa]]でも可。
  * [[:microtube holder]]。
  * 細口と太口[[:pipette]]
  * [[:hot plate]]


===== 手順 =====

[[dehydration]]の後に行うこととする(軽めで良い)。
蝋物質が無いと思われる場合も脱脂の意味もあるので行うこと(加温しない方法で良い)。


==== 蝋物質が多い場合(加温する) ====

前の処理は[[dehydration]]で、検体は[[soaking dish]]にあるとする。

(1) 検体を太口[[:pipette]]で[[dehydration agent]]ごと[[:soaking tube]]に[[:specimen transferring|移動]]後、[[dehydration agent]]を注意深く(検体を吸い込まないように)[[:decantation]]する。

(2) [[dewaxing agent]]を100〜500μL程度加える(検体の量とかワックスの量にもよる)。

(3) [[:soaking tube]]のフタをしめて60℃程度に加温し1時間ほど静置する。
その後あるいは途中で[[stereo microscope]]で観察して溶けているようだったら終了する。

(4) 少し冷ます。
[[dewaxing agent]]が少なかった場合、どろどろしたグリース状になりピペットで吸い取れないので､
その場合は[[dewaxing agent]]を追加して振ればさらさらになる。
薄いワックスの膜が見られるようなら、[[dewaxing agent]]で何回かすすぐ。


==== 蝋物質が少ない場合(常温で処理) ====

加温しないので[[soaking tube]]に移動する必要はない。

(1) 容器のフタとかに付いている水分をティッシュペーパー等で除去する。

(2) [[dehydration agent]]を注意深く(検体を吸い込まないように)[[:decantation]]する。

(3) [[dewaxing agent]]を200μL〜500μL程度加える。

(4) 常温で1時間ほど静置する。
その後あるいは途中で[[stereo microscope]]で観察して溶けているようだったら終了する。



===== 注意点 =====

どの薬品も引火性が高いので火災には十分注意すること。



===== 備考 =====

容器について。
[[:pp]]は一般的には[[:xylene]]に耐性が無いとされているので､
使用後は中の薬液を排出して乾燥しておいた方が良いと思う。
また壊れる前に定期的に交換した方が良いかもしれない。
その意味ではガラス製のフタ付きの小さな[[test tube]]が良いのだろうけど､適当なものの入手が難しい。

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===== 関連事項 =====

  * [[dewaxing:study]]


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===== 参考文献 =====
~~REFNOTES~~
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===== Backlinks =====
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===== TODO =====
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