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--- bleaching [2025/02/21 07:40] – Konajirami-ya
+++ bleaching [2026/03/29 14:52] (現在) – Konajirami-ya
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 <WRAP center round todo 60%>
-工事中
+  * 漂白を[[maceration]]の前に行う方向でテスト中。
+  * 漂白の終了後、そのまま[[maceration]]に移行!!
+  * 写真
 </WRAP>
-検体を漂白剤に浸漬してある程度透明化させる処理。
+検体を漂白剤に浸漬してある程度透明化する処理。
 黒く不透明な検体の場合に行う。
-光学顕微鏡は透過照明なので不透明だと観察できない。
+漂白剤には[[hydrogen_peroxide|オキシドール]]に促進剤として10%[[ammonia_water]]を添加したものを使う。
-漂白剤には[[hydrogen_peroxide]](オキシドールで良い)に促進剤として10%[[ammonia_water]]を添加したものを使う。
+どちらも薬局で普通に購入できる。
+文献にはもっと濃い濃度の試薬が書かれているがこの濃度でも十分可能だが、少し余計に時間を要するかもしれない。
-===== 順番 =====
+処理の順番は
+[[:dewaxing]]の後、[[:maceration]]の前に行う方向で現在テスト中。
+[[:maceration]]の前に漂白しておいた方が､[[:maceration]]の終了判断が行いやすい。
-私は長い間、[[dewaxing]]の後で漂白処理を行ってきたが処理が少し面倒になる。
-ワックスが少ない検体で試してみたところ[[dewaxing]]の前に行っても問題なさそうだった。
-ワックスが多い検体でどうなるかは未調査。
-[[maceration]]の前に行うことも可能だが終了の判断が難しい。
-前に行いたいと思うのは、イヌツゲクビレコナジラミのように背面も覆面も黒く[[maceration]]の終了の判断がつきにくいとき。
-アオキコナジラミは覆面側が透明なので良いのだが。
-軟弱個体の場合は[[maceration]]の前に行う。
+===== 用具 =====
-===== 道具 =====
   * 容器は[[glass dishes]]でも[[plastic dishes]]でも良い。
-  * [[microscooper]]や[[microbrush]]。気泡が発生し検体が浮いてくるので、[[pipette]]は使えない。
+  * 終了したら個体から順に[[maceration]]を行うので､そのための容器等。
-  * [[hydrogen_peroxide]]
+  * [[inoculation loop]]か[[microbrush]]]。だいたい気泡が発生して浮いてくるので掬うには[[inoculation loop]]の方がが使いやすい。
-  * [[ammonia_water]]
+  * [[hydrogen_peroxide|オキシドール]]
+  * 10% [[ammonia_water]]
-透明な容器でかつ加温する場合は[[anti-fogging]]処理を施すとフタをしたまま中が見れて便利。
-またプラスチック容器の場合は[[plastic dishes#濡れ性の改善]]を行うと見やすくなる。
 ===== 手順 =====
-容器に検体と漂白剤を入れフタをしてしばらく置く。
+[[:dewaxing]]の後、[[:ethanol]]や[[:ipa]]ですすぐ。
-ときどき観察して、完了した個体から順番にすくい上げる。
+容器Aに検体とオキシドール1mL程度と10% [[ammonia water]]を数滴入れしてしばらく置く。
+量は適当で良い。
+加温する場合はフタをする。
+容器Bには[[maceration]]の準備をしておく。
+[[stereo microscope]]を使い[[transmitted illumination]]で観察して、完了した個体から順番に[[inoculation loop]]等を使ってすくい上げ容器Bに落とす。
+常温でもできるが加温すると早くできる。
+処理時間は設定温度60度で加温しておよそ数分〜2時間ぐらいか?
+-> 種ごとに例を挙げる。
+どれくらいの濃度に仕上げるか?
+この後の[[:maceration]]でも漂白されるので､少し透けてきた状態で終了する。
+特に､丸まってしまう検体の場合、丸まりそうになったらどんどん掬う。
+やり過ぎると後戻りできないので十分注意すること。
+写真
+===== 調査 =====
+文献にはだいたい同じようなことが書かれている。
+かなり濃い濃度の試薬が使われており入手は難しい。
+> <wrap>Black whitefly pupae have to be partially bleached before they can be examined
+on microscope slides. After maceration and brief water rinse to remove KOH, specimens
+were soaked in freshly-mixed bleach made of equal parts of 30-volume hydrogen peroxide
+and 880 ammonium hydroxide.[(sirisena2013>>page:141)]</wrap>
+**880 ammonium hydroxide** : 密度が0.880 g/cm³である高濃度のアンモニア水溶液（アンモニア水）を指す通称で、約28～30重量%（w/w）のアンモニア（NH3）を含有する飽和溶液に相当するらしい。
+**30-volume hydrogen preoxide**: 30-volumeは1Lあたりに酸素の量が30L含まれている意味で､9% (w/w) 過酸化水素水に相当するようだ。
-どれくらいの濃度に仕上げるか?　写真
-処理時間はおよそ30分〜2時間ぐらいか?
-再調査。
-常温でも加温しても良い。
-<WRAP hide><nowiki>
 ===== 参考文献 =====
 ~~REFNOTES~~
-</nowiki></WRAP>
 ===== Backlinks =====