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行 3: 行 3:
 <WRAP center round todo 60%> <WRAP center round todo 60%>
 実験中 実験中
 +
 +揺れ具合とかも、ちゃんと比較しないと。
 +</WRAP>
 +
 +<WRAP tdl right 40%>
 +{{:preparation:lidded_chamber_method-03.jpg?400x300|}}
 +フタ付きチャンバー法
 </WRAP> </WRAP>
  
-[[mounting]]を行う前に検体を確認る。+[[mounting]]を行う前に検体を確認したい場合がある。
 特にコナジラミの蛹殻の場合、 特にコナジラミの蛹殻の場合、
 通常背面を上にするのだけど[[stereo microscope]]では背面がどっちかよくわからない場合があったり、 通常背面を上にするのだけど[[stereo microscope]]では背面がどっちかよくわからない場合があったり、
 中が奇麗に処理されているか良く分からなかったりする。 中が奇麗に処理されているか良く分からなかったりする。
 そのため簡易的に[[biological microscope]]で見る方法があるとよい。 そのため簡易的に[[biological microscope]]で見る方法があるとよい。
-[[coverslip]]を掛けてしまうと刺毛が取れたりするので、潰さないようにして観察する必要る。 +[[coverslip]]を掛けてしまうと刺毛が取れたりするので、潰さないようにして観察できると良い。 
-いくつかの方法をしている+ 
 +倒立顕微鏡の方が楽にできそうな気もするが、 
 +ここでは一般的な正立顕微鏡を対象とする。 
 + 
 +フタ付きチャンバーのツール 
 +[[clearing]]用の処理容器として使うのもアリかなぁと思う 
 + 
 +<WRAP clear/>
  
-<WRAP tdl right 40%>{{:preparation:tiny_mount_a.png?400x300|}}</WRAP> 
 ===== 簡易的な方法 ===== ===== 簡易的な方法 =====
  
行 21: 行 34:
 問題点としては[[clove oil]]は揮発成分が含まれており対物レンズに付くと思われるので定期的な掃除が必要になると思う。 問題点としては[[clove oil]]は揮発成分が含まれており対物レンズに付くと思われるので定期的な掃除が必要になると思う。
 掃除しないで放置しておくとどうなるかはわからない。 掃除しないで放置しておくとどうなるかはわからない。
-<WRAP clear/>+<WRAP tdl center 60%>{{:preparation:direct observation.png?720x270|}} 
 +1:[[slide glass]]、2:検体、3:[[clove oil]] 
 +</WRAP> 
 + 
 + 
 +===== チャンバー法 =====
  
 +※ 適当に命名した。バンク法の方がいいか?
  
-<WRAP tdl right 40%>{{:preparation:tiny_mount_b.png?400x300|}}</WRAP> +[[washers]]をスラドガラスに接着する。 
-===== マイクロチャンバー法 =====+内側に検体を入れてクローブオイルを水平になるように盛る。 
 +このまま[[biological microscope]]を用い低NAで観察する。 
 +簡易的な方に比べてクローブオイル面が水平に近くなる。 
 +揮発成分が対物レンズに付着する問題は残る。
  
-<WRAP center round todo 40%> +<WRAP tdl center 60%>{{:preparation:chamber method.png?720x270|}} 
-実験中。+1:[[slide glass]]、2:[[washers]]、3:検体、4:[[clove oil]]
 </WRAP> </WRAP>
  
-ワッシャーAは[[slide glass]]接着されておりマイクロチャンバーを形成する。 +[[washers]]には[[ptfe]]製を使う(液が流れにくい)。 
-マイクロチャンバーは[[clove oil]]が流れようにするためと液面平らになるようにするもので +大きは適当で良いが、私がとりあえず作ったのは内径5mm、外径10mm、厚さは0.2mmと0.3mm。 
-[[ptfe]]製が良い。 +接着剤には[[uv resin]]を使用。 
-[[ptfe]]は超難接着材料だがスジを入れるなどて物理的に固定する(出来ると良いが…)。 +[[ptfe]]は超難接着材料だし[[uv resin]]接着力がほんど無いが、力が掛からないせいかとりあえずくっついてる。 
-ワッシャーBは[[coverslip]]側に接着しフタ機能する。 +[[uv resin]]は[[clove oil]]や[[gaa]]に対してあまり耐性が無いの(一般的な接着剤の中では耐性があ方だが)、 
-この状態で[[biological microscope]]で観察する。+長時間の使用は避けた方が良く、使用後は洗浄しておいた方が良いと思う
  
-光学的にいかさまであり、また[[clove oil]]の揮発成分が[[slide glass]]を曇らせるので短時間しか観察できないが、 
-ひっくり返さなくて良いのでいくらか気楽に作業できる。 
  
-<WRAP clear/>+===== スペーサー法 =====
  
-<WRAP tdl right 40%>{{:preparation:tiny_mount_c.png?400x300|}}</WRAP> +※とりあえず適当に命名した。 
-===== 反転マイクロチャンバー法 ===== + 
-<WRAP center round todo 40%> +チャンバー法と同じ道具を使い、上から[[coverslip]]を掛ける。 
-実験中。+[[washers]]がスペーサーとなり検体が潰れない。 
 +光学的にも比較的問題が少なく揺れも少ないように思う。 
 + 
 +<WRAP tdl center 60%>{{:preparation:spacer method.png?720x270|}} 
 +1:[[slide glass]]、2:[[washers]]、3:検体、4:[[clove oil]]、5:[[coverslip]]
 </WRAP> </WRAP>
  
-その1と異なりワッシャーABともに[[coverslip]]側に接着されている。 +作り方ンバ同じ
-ワッシャーAは[[ptfe]]製を使用すべき。 +
-検体を[[clove oil]]を入れた後ひっくり返して[[slide glass]]に載せ[[biological microscope]]で観察する。 +
-光学的にその1よりまともで揮発成分の影響を受けないので長時間観察できるが、 +
-ひっくり返す作業が発生するので、神経を使う+
  
  
-<WRAP clear/>+===== フタ付きチャンバー法 ===== 
 + 
 +※とりあえず適当に命名した。 
 + 
 +チャンバー法にフタを掛けたもの。 
 +フタは厚めの[[washers]]と[[coverslip]]で作る。 
 +[[clove oil]]の揮発成分が対物レンズに付くことは無いが、[[slide glass]]を曇らせるかもしれない。 
 +扱いは比較的楽。 
 +光学的にはあまり良くないが実体顕微鏡で見るよりは遥かに見やすい。 
 + 
 +<WRAP tdl center 60%>{{:preparation:lidded_chamber_method.png?720x270|}} 
 +1:[[slide glass]]、2:[[washers]]A、3:検体、4:[[clove oil]]、5:[[coverslip]]、6:[[washers]]B 
 +</WRAP> 
 + 
 + 
 +フタの作り方。 
 +フタに使う[[washers]]は内径が[[washers]]Aの外径より少し大きめのもので、 
 +少し厚めのものを使う。  
 +材質は[[pom]]製を使った。 
 +[[pom]]は耐薬品性に優れており、プラスチック[[washers]]としては一般的でサイズが豊富。 
 +こちらも難接着材料。 
 +大きさは内径10.5mm、外径22mm、厚さ0.5mm(もう少し厚いのにすればよかった)。 
 +接着剤は同じく[[uv resin]]を使用した。 
 +いちおうくっついてるがどれくらい持つだろうか。 
 + 
 + 
 +===== 反転チャンバー法 ===== 
 + 
 +※とりあえず適当に命名した。 
 + 
 +チャンバー法とは異なり[[washers]]AとBともに[[coverslip]]側に接着されている。 
 +[[washers]]Aは[[ptfe]]製を使用すべき。 
 +検体をチャンバーに入れ[[clove oil]]で満たした後、ひっくり返して[[slide glass]]に載せ[[biological microscope]]で観察する。 
 +光学的にチャンバー法よりまともで揮発成分の影響を受けないので長時間観察できるが、 
 +ひっくり返す作業が発生するので、神経を使う。 
 +素材とかはチャンバー法と同じだが、[[washers]]Bはもう少し厚いものにした方が良かったかも。 
 +ちょっと使うのが面倒くさいかなぁ。 
 + 
 +<WRAP tdl center 60%>{{:preparation:inverted_chamber_method.png?720x270|}} 
 +1:[[slide glass]]、2:[[washers]]A、3:検体、4:[[clove oil]]、5:[[coverslip]]、6:[[washers]]B 
 +</WRAP>
  
  
pre-mounting_confirmation.1774693710.txt.gz · 最終更新: 2026/03/28 19:28 by Konajirami-ya