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--- acidification [2025/03/01 10:14] – Konajirami-ya
+++ acidification [2026/04/18 11:20] (現在) – Konajirami-ya
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 <WRAP center round todo 60%>
-工事中
+実験中
 </WRAP>
 [[maceration]]後、アルカリ性だった検体を酸性にする処理。
 アルカリ性のままだと標本を保存中に色が抜けてくるらしい。
+またアルカリ性だと[[acid fuchsin]]による[[staining]]がうまく行かない。
-私はちゃんとやってなかったが
+===== 用具 =====
-([[dewaxing]]で[[acetic acid]]と[[ethanol]]を使うのでなんとかなってたのかも)、
-一般的にはやっといたほうがいいかもしれんなぁ。
+  * 細口[[pipette]]
+  * [[soaking dish]]
+  * [[gaa]]
+  * 70% [[ethanol]]
 ===== 手順 =====
-  * 水に浸ける
+[(kondo2022>>direct:yes)]による。
-  * 酸性化剤に浸ける
-===== 酸性化剤 =====
-==== 酸アルコール ====
-標準的な方法。
-  * 1% [[hcl]]
-  * 30% 水
-  * 残り[[ethanol]]
-[[koh]]は[[hcl]]で中和されてKCL[[wpjp>塩化カリウム]]が生成される。
-塩化カリウムは中性(pH 7.0)で水溶性。アルコールには溶けない。
-==== 酢酸 ====
-  * 30% 水
-  * 70% [[acetic acid]]
-[[koh]]を[[acetic acid]]で中和すると[[wpjp>酢酸カリウム]]が生成される。
-酢酸カリウムは弱アルカリ性(pH 9.7)で水、アルコールに溶ける。
-使用例
-==== その他 ====
-食酢、クエン酸とか使えるか。
-===== 調査 =====
-カイガラムシ
-> <wrap :en> 3. Rinsing and acidification
+  - 前処理で使用した薬剤([[maceration]]の場合水洗で使用した水)を[[decantation]]する。
-% KOH solution is a potent base (i.e. strong alkali) and it is necessary to wash it all away with
+  - 容器はそのままで酸性化剤を加える。
-distilled water. Add a drop of detergent or liquid soap to the distilled water to prevent the insect
+  - フタをして常温で少なくとも10分静置する。
-from floating. If the KOH solution is not rinsed away properly, specimens may not stain well or
-become decolourized after some time. At this stage, any unsightly tracheae and eggs remaining in
-the body may be carefully extracted through the hole or slit using insect pins, microspatula, small
-paint brushes etc., ensuring that the body is left in the appropriate shape and dorso-ventrally
-flattened. After soaking in water for 5-10 minutes, the specimens are then transferred to acidified
-% alcohol (isopropanol or ethyl alcohol) for at least 10 minutes to acidify the cuticle, neutralize
-any remaining KOH, and start the dehydration process.
-[(kondo2022)]
-</wrap>
-> <wrap>**3 70％酢酸液中で洗浄，中和**
+酸性化剤は以下の組成のものを使う
-水酸化カリ液処理が終了した標本は，70％酢酸を入れたシャーレに移して，30 ～ 60 分程度常温で静置する。
-このときに水酸化カリ液中に入れた酸性フクシンが発色して虫体がピンク色になり，後の処理で虫体を見失うことがなくなる。
-[(tanaka2014>>pages:49)]</wrap>
-なるほどー
+  * [[gaa]] 1容
+  * [[etoh]]もしくは[[ipa]] 2容
+  * [[purified water]] 2容
-腹吻亜目
+===== 関連事項 =====
-> <wrap :en>Acidification: Any traces of KOH left in the specimen prevented staining or caused it to decolourize later. Specimens were therefore, rinsed in distilled water for at least 3 minutes to
+  * [[:acidification:study]]
-remove KOH from the insects and the spatula, before transfer to acidified 80% alcohol for at
-least 10 minutes to acidify the cuticle. [(sirisena2013>>pages:141)]</wrap>
 ===== 参考文献 =====
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 <wrap small>
 [[:refnotes:kondo2022]],
-[[:refnotes:tanaka2014]],
-[[:refnotes:sirisena2013]],
 </wrap>