脱ロウ

脱ロウ処理

蝋物質を取り除く処理。脱脂も兼ねる。蝋物質が残っていると奇麗な標本にはならない。

文献に載っている方法ではキシレンとフェノールの混合液等が使われるのだけど、できるだけ安全に処理できるように別の方法を模索している。加温すれば特にフェノールを使わなくても問題無いように思う。ただし揮発性が高いので､漏れの少ない浸漬チューブを使う。蝋物質が少ない場合は加温しなくても良い。

道具

蝋物質が無いと思われる場合も脱脂の意味もあるので行うこと(加温しない方法で良い)。 → やらなくて良い場合もある。

ロウ物質が多い場合は加温する。加温する場合は浸漬チューブを使う。加温しない場合は浸漬皿で良い。

(1) 前処理が軟化や酸性化等脱水されていない場合は、脱水剤で2回ほどすすぐ。容器のフタなどについた水分も拭っておく。

(2) 検体を浸漬チューブに移動する。具体的には溶媒ごと太口ピペットで移動するか、チューブに99.5%エタノールを少量入れてマイクロ平ブラシで移動する等の方法で行う。その後溶媒を細口ピペットで慎重に️排液する。

(3) 脱ロウ剤を100〜500μL程度加える(検体の量とかワックスの量にもよる)。

(4) 浸漬チューブのフタをしめて60℃程度に加温し1時間ほど静置する。その後あるいは途中で実体顕微鏡で観察して溶けているようだったら終了する。

(5) 少し冷ます。脱ロウ剤が少なかった場合、どろどろしたグリース状になりピペットで吸い取れないので､その場合は脱ロウ剤を追加して振ればさらさらになる。薄いワックスの膜が見られるようなら、脱ロウ剤で何回かすすぐ。

加温しないので浸漬チューブに移動する必要はないが、あまり長時間浸漬皿に置いておくと蒸散してしまうので注意。

(1) 容器のフタとかに付いている水分をティッシュペーパー等で除去する。

(2) 脱水剤を注意深く(検体を吸い込まないように)️排液する。

(3) 脱ロウ剤を200μL〜500μL程度加える。容器によっては多めにしておいた方が良いかもしれない。

(4) 常温で1時間ほど静置する。→ たぶんそんなにいらない。その後あるいは途中で実体顕微鏡で観察して溶けているようだったら終了する。

どの薬品も引火性が高いので火災には十分注意すること。

容器について。ポリプロピレンは一般的にはキシレンに耐性が無いとされているので､使用後は中の薬液を排出して乾燥しておいた方が良いと思う。また壊れる前に定期的に交換した方が良いかもしれない。その意味ではガラス製のフタ付きの小さな試験管が良いのだろうけど､適当なものが見つからない。