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脱ロウ
蝋物質を取り除く処理。 蝋物質が残っていると生物顕微鏡で奇麗に見えない。 文献に載っている方法はフェノールが使われるのだけどこれは劇物でありできるだけ使わないようにするため別の方法を実験している。 蝋物質自体はキシレンやd-リモネンで溶かすことが出来るがかなり時間が掛かるので湯煎にする。 容器はポリプロピレン製のマイクロチューブを使う(ガラス製の試験管の法が良いと思うが短いものの入手が難しい)。 あと脱水剤の意味で少量のエタノールかイソプロピルアルコールを加えたものを薬液として使う。
順序についても文献に載っている方法ではかなり後に行なわれるが、虫の標本Wikiでは最初( 剥離の次)に行う方向でテスト中。
道具
- 細口と太口ピペット
- 鍋と水と温度計とコンロ
手順
(1) 検体を太口ピペットで処理容器に移動後。媒体を️排液する。
(2) 水分を除くため、エタノールかイソプロピルアルコールですすぐ。具体的にはエタノール等を100μLほど加えて軽く振り、細口ピペットで️排液する。検体を吸い込まないように注意すること。
(3) キシレンかd-リモネンを50〜200μL程度加える。エタノールかイソプロピルアルコールを1滴ぐらい加える(すすいだときの残りがあるので新たに追加しなくても良いかもしれない)。
(4) 容器にフタをして、80℃程度の湯煎にする。 時間は水から入れた場合80℃になった時点でだいたい溶けていると思うが、それから1分ぐらいおく。
(5) 少し冷ます。 薬液が少なかった場合、どろどろしたグリース状になるので、 その場合はキシレンかd-リモネンを追加して振ればたぶん溶ける。
注意点
どの薬品も引火性が高いので火災には十分注意すること。
備考
溶剤はd-リモネンが入手しやすく、人体への害も少なそうなのでオススメ。
容器は耐薬品性、透明性の点でガラス製の試験管方が良いと思うが、 検体がくっつきやすいというデメリットもある。 わざわざ入手する必要もないかなぁ。 ポリプロピレン製マイクロチューブは一般的にはキシレンに耐性が無いとされているので、 使用後は中の薬液を排出して乾燥しておいた方が良いと思う。 また壊れる前に定期的に交換した方が良いかもしれない。
プッシュキャップ式のマイクロチューブは外れないか少し不安だが、d-リモネンやキシレンの沸点は100℃以上なので問題ない。またエタノールやイソプロピルアルコールの沸点が80℃前後なので、温度を上げすぎなければ大丈夫だと思う。
関連事項
===== 参考文献 ===== ~~REFNOTES~~

